An ex vivo Model to Search Immune Biomarkers of Dengue Immunopathogenesis

不同型登革病毒相繼感染是造成登革出血熱的重要致病因之一。人們相信不同型登革抗體的存在，會促進病毒侵入白血球，而增強免疫反應分泌免疫因子，造成血管通透性增加，血小板耗損。進而造成出血性登革熱（DHF），甚至登革休克症候群（DSS）。我們先前已經開發出一個可以同步監測登革病毒量和免疫反應的模式(Chen & Yang et al. FEMS ImmunolMed Microbiol 30:1-7, 2001)，也在體外模式發現不同型登革抗體可以促進IL-10 和抑制IFNr的分泌(Yang et al. J Med Virol 63:150-157, 2001)。近來在病人身上的研究更證實登革出血熱的病人血中的病毒量沒有比一般登革熱病人高；反而是與其幫助性免疫反應（T helper reaction）異常有關(Chen & Yang et al. FEMS Immunol Med Microbiol 44:43-50, 2005)。這樣的發現仍不足以完全瞭解登革出血熱的全貌。由於登革出血熱經常是不同型登革病毒交叉感染增強免疫反應的結果，尤其是第一型接續著第二型登革感染的嚴重性更明顯。台灣南部高雄屏東先前曾有第一型流行；加上近幾年的夏天都有第二、第三和第四型的流行。顯然已進入登革出血熱的好發期，因此很值得我們利用蛋白質體去全觀性的探究不同型登革相繼感染的免疫反應，進而尋找有用的生物指標（Biomarker(s)）來防制登革出血熱，降低致病性與死亡率就變得特別重要。目前登革熱仍未有安全的疫苗；也沒有可信的動物模式可用！所以我們將以外加第一型抗體於人類白血球後感染第二型病毒，來模擬抗體加強反應。以及使用未曾感染與曾經感染第一型登革熱病人的白血球，加入登革二型病毒去分別模擬初次與不同型相繼登革感染，尋找可能的免疫生物指標。居於上述的立論根據與應用潛力，這個研究將設定兩項研究目標去開發這個應用潛力。1. 取正常人白血球在有或無登革一型抗體存在下，加入登革二型病毒去研究不同型登革抗體對登革感染的免疫致病性功能蛋白質體(包括分泌性蛋白質體與白血球細胞內訊息蛋白質體變化)，去尋找血清和血球免疫生物指標。2. 取未曾感染與曾經感染第一型登革熱病人的白血球，加入登革二型病毒去分別模擬初次與不同型相繼登革感染的免疫致病性功能蛋白質體研究(包括分泌性蛋白質體與白血球細胞內訊息蛋白質體變化)，去尋找免疫生物指標。利用這種全觀和定量的蛋白質體分析，將可以研究抗體加強反應下；或不同型登革相繼感染的異常反應下，上百個蛋白質或增減或活化互動的釐清。而且藉由其已知免疫因子的抗體加以確認，或其相對基因(mRNA)表現的確認，將是開發登革出血熱早期生物指標的重要研究工作。從這個研究找到的指標，如果在真正登革出血熱爆發時獲得印證，將是比開發疫苗更實用的方法。

Project ID:PC9508-0890
External Project ID:NSC95-2314-B182-042-MY2