Apply Chemical Proteomics and Bioinformatics to Investigate the Protein Target of Effective Compositions from Salvia miltiorrhiza

丹參屬鼠尾草科植物根，為現代醫學最常研究之傳統草本藥物之一；因其對肝及心、腦血管療效絕佳；近來對丹參的作用研究主要集中在改善心、肝、肺、腦等臟器的缺血再灌流損傷及治療肝細胞疾病如肝纖維化、肝硬化、肝癌等之作用；另有調節免疫反應、抗感染和抗腫瘤等效果。其提取的化學成分，有脂溶性的二.類和水溶性酚酸類等。目前所知；丹參內含成份具有藥物多樣性，即各類化合物擁有一組特別的蛋白標的來執行藥物療效，本研究針對這些蛋白質做一系列探討，冀望找尋作用標的以增加藥效並排除其細胞毒性。本計畫研究以丹參具藥性成份為研究模式，配合系統生物學-基因、蛋白質及代謝體學觀點探討其藥效、成分與作用機制。先期研究初步發現水層多酚類化合物具有抑制病態平滑肌增生而不影響正常平滑肌生長；相對於酯溶性化合物則有相當的毒殺效果，說明丹參為何對各別症狀的治療效果不盡相同。如能有效分類其化合物一一鑑別，分析合成及代謝路徑，並配合療效評估，為中草藥之效用提供了最強而有力的學術證據。本計畫預定以二年時間深入探索丹參酮/丹參酸衍生物生物活性篩選及專一性分子標的作用機制；另外利用生物資訊整合丹參酮/丹參酸衍生合成與代謝之酵素及其於心血管及抗癌等作用機制。本計劃將完成下列目標：1.體外生物活性篩選(第一年).. 萃取物抗氧活性分析.. 萃取物增生與毒性分析2.建立DIGE(Two-dimensional difference gel electrophoresis (2-DIGE)圖譜 (第一年).. 分析經丹參粗抽物治療前後細胞，其蛋白質變化與修飾.. 區分二.及多酚類作用機理。.. 處理後細胞分為細胞質、核、膜及胞器分析蛋白質表現，減少全細胞之干擾及複雜性。3.經由化學蛋白質體學找尋二.及多酚類之蛋白質標的(第一年).. 螢光顯微鏡探索二.及多酚類衍生物於細胞代謝作用位置。.. 將衍生物鍵結於磁珠或樹脂，藉以分析鍵結於蛋白質為何，釐清其作用的多樣性。4.由表現次序標的來探索丹參二.類化合物及多酚類合成及代謝途徑。(第二年).. 利用長庚基因體中心設備將上述不同時期根部EST 點於玻璃片上，配合LC-MS 結果，分析二.化合物及多酚類合成代謝酵素表現差異。.. 針對二.及多酚類化合物合成代謝酵素基因表現在酵母菌內，觀察其代謝差異。深入探討丹參基源合成代謝與其藥理療效，為中草藥研究之首要目標；本計劃合併現代生物科技技術與臨床資料，帶動對中草藥現代研究發展更進一步提升，助益草藥生技萌芽。此外，更進一步探討這些不同型別的丹參所具有的特別療效；達到中醫藥系統化、科學化的目的。

Project ID:PC9508-1862
External Project ID:NSC95-2320-B182-025