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Abstract
丹參--鼠尾草屬多年生植物根莖為現代醫學最常研究之傳統草本藥物之一,因其對肝及心、腦血管療效絕佳,中外相關研究極多。其提取的化學成分,有脂溶性的二.類和水溶性酚酸類,脂溶性成分有丹參酮Ⅰ、丹參酮Ⅱa、丹參酮Ⅱb、隱丹參酮等;水溶性成分有原幾茶醛、丹參素(丹參酸甲)、丹參酸乙、鎂-丹參酚性酸B(LSA-R)等。近來對丹參的作用研究主要集中在改善心、肝、肺、腦等臟器的缺血再灌流損傷及肝細胞的損傷如肝纖維化、肝硬化、肝癌等的作用;另有調節免疫反應、抗感染和抗腫瘤等效果;本研究計畫針對已開發國家的重大死因-心血管疾病或障礙,期能在種類繁多的中草藥中開發出具治療心血管疾病功能的中藥-丹參對心血管疾病療效為主題;並從基因和蛋白質體學觀點探討其藥效、成分與作用機制。丹參對各別症狀的治療效果不盡相同,現今配合日新月異的生物技術及系統生物學概念將使得丹參的應用與研究朝向科學化、更經濟、更環保與更有效的目標發展;也為中醫藥之療效提供了最強而有力的學術證據。本計畫預定以三年時間建立完整的丹參表現標的基因庫暨蛋白質圖譜及專一性篩選分子;此外利用生物資訊觀念整合丹參二.類化合物生合成與代謝之酵素及其於心血管作用機制。本計劃將完成下列目標:1.建立丹參表現次序標的(Expressed Sequenced Tags)與蛋白質資料庫(ProteomicsProfile)以建立表現次序標的基因庫為主軸,利用隨機定序暨電腦快速分析能力,建構丹參表現基因資料庫,並利用基因技術大量複製生產某種篩選分子片段經限制酵素反應及表現次序標的基因晶片實驗,得以有效且快速篩選具極佳心血管疾病療效之丹參植株。丹參有效成分應為經酵素代謝之二級代謝物,故酵素代謝活性與該代謝產物必形成特定的比例,基於蛋白質本身特性,應直接分析丹參酵素蛋白本身、修飾後(醣基、磷酸化等)的情形及胞器可能對於細胞造成之影響,因此蛋白質資料庫的建立於丹參研究扮演舉足輕重之角色。2.建立丹參二.類化合物結構式配合長庚醫院中草藥平台,利用乙醇初抽乾燥,接續使用正相矽膠EtOAc 次序性分離成份,最後利用LC-IonTrap MS 及NMR 鑑定個別化合物以確認丹參二.類化合物正確結構。3.體外生物活性篩選採用A10(平滑肌細胞)與H9C2(心肌細胞)體外實驗,分以細胞增生及抗氧化性測試丹參化合物之藥理活性,並以微陣列晶片與二維電泳分析作用機制,最後以LDH 評估其毒性。4.由表現次序標的來探索丹參二.類化合物合成及代謝途徑收集丹參根部組織並轉植成其代謝活性之表現次序標的(EST) ,經由此步驟來定量並預估丹參二.類生合成所含酵素基因表現、代謝及其調控網路。5.丹參系統生物學分別將丹參化學組成分、活性、細胞與動物反應依次輸入電腦,利用線性關係設計程式,建立資料庫。此外,更進一步探討這些不同型別的丹參所具有的特別療效;達到中醫藥系統化、科學化的目的。深入探討丹參基源合成代謝與藥理療效,為中草藥研究之首例;本計劃合併現代生物科技技術與臨床資料,將帶動對中草藥現代研究發展水準提升並助益中草藥生物科技之萌芽。
Project IDs
Project ID:PC9308-2069
External Project ID:NSC93-2320-B182-049
External Project ID:NSC93-2320-B182-049
Status | Finished |
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Effective start/end date | 01/08/04 → 31/07/05 |
Fingerprint
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