Establishment of Hepatitis Viral Gene Expression in Caenorhabditis elegans

秀麗桿線蟲是生長於土壤非致病的圓蟲，近年來它成為生命科學各領域，如神經生物，發育生物，細胞生物，生體及動物行為研究的模式，由於它的簡單操作，生活史短(3.5 天)，容易操作，實驗費用低。但用線蟲當材料研究病毒或細菌與宿主細胞相互作用才剛進入開始的階段，本實驗研究B 型、D 型肝炎病毒已超過二十年，仍有一些分子生物學的問題，尚未完全解決，比如，D 型肝炎病毒的大抗原如何與B 型肝炎病毒表面蛋白互動，結合成一個次病毒顆粒。所以在此三年研究計畫將開展一個創新性的研究方法，將病毒基因送入線蟲來回答尚未釐清的問題，我們改用線蟲作研究的理由有三:1)線蟲受病毒影響可觀察的表現較傳統用肝癌或哺乳類細胞為廣，包括可觀察是否影響線蟲發育，生長，及各類不同細胞分別的影響，2)線蟲的基因體已完成定序完畢，而且各類突變背景的線蟲可以向線蟲中心免費索取，3)線蟲的RNAi 系統很容易壓抑某基因表現而瞭解該蛋白參與HBV 與HDV 互動的角色。所以本研究計畫目標:1)利用微注射或基因槍法建立表達D 型肝炎大型或小型抗原的線蟲，觀察這些蛋白是否會影響線蟲的表現型，2)建立表達B 型肝炎三種大小不同(大、中、小)表面蛋白的線蟲，觀察其表現型，3)將表現D 型肝炎大型抗原的線蟲與表現B 型肝炎病毒小型表面蛋白的線蟲雜交，取得雙表現的線蟲，觀察是否能產生病毒次顆粒，4)利用不同基因背影的線蟲或用RNAi 的方法，找尋與HBV，HDV 兩抗原互動相關的分子，解開D 型肝炎病毒如何穿B 型肝炎表面蛋白之謎。除上述研究外，利用本計畫將本實驗室發展成為台灣線蟲核心實驗室，推動線蟲研究，在未來幾年內能讓台灣達一定的線蟲研究能量。

Project ID:PC9607-0303
External Project ID:NSC96-2320-B182-012