Moecular Mechanisms of Virulence in Enteric Bacteria

  • Ou, Jonathan T. (PI)

Project: National Science and Technology CouncilNational Science and Technology Council Academic Grants

Project Details

Abstract

在這研究計劃,我們想從幾個不同角度研究沙門氏菌裡面所含毒性質體參與宿主菌之致病性所扮演的角色。這種質體已被證實在致病作用上扮演了重要角色。透過這質體的研究,我們想了解沙門氏菌致病的機轉,以希望終究能製造出有效的疫苗以及其他控制的方法,同時也希望能了解宿主特異性感染的機轉。這計劃分為三部份。第一為有關沙門氏鼠傷寒桿菌所含毒性質體。在這方面,我們已製備了60幾株以Tn5 插入的突變種質體。最近其中七株的Tn5插入點,亦即基因的所在地的鹼基順序已訂出來。這七株突變種的三個感染途徑的LD50也已訂出來,以查各突變株對感染步驟的大體影響,也做了更進一步仔細的感染步驟,如從胃腸至肝脾臟之穿透力,抑止T細胞之刺激繁殖,附著並活化吞食細胞之吞食能力,抵抗吞食細胞之殺菌力,以及在吞食細胞內之繁殖力等的探討,並得到初步的結果。進一步我們將訂出這些基因之陽性(dominance)或陰性(recessive),轉錄以及轉譯情形。第二部份乃各種沙門氏菌(主要為豬霍亂血清型,都伯林血清型,腸炎血清型,鳥類血清型以及鼠傷寒血清型)毒性質體(Virulence plasmids)的比較學。因為這些質體似乎屬於同一個不相溶性群(Incompatibility group),故進化上似乎是從共同祖先質體演化而來。 故我們希望得到一些資訊,以探知是否它們的致病性基因亦可在異宿主(不同沙門氏菌體)內表現出來。為此,我們已製造出30株有Tn5標誌的各種質體,也分別以transformation放入各異血清型內。現在已開始用標準老鼠毒性試驗以檢查各有標誌的質體是否仍具備有表現毒性之能力。第三部份為研究質體上毒性能力表現之機轉,宿主特異致病性,以及其他目的,我們曾試圖標誌鳥類沙門氏菌,如Pullorum 和 Gallinarum 的質體。在實驗過程中發現有趣的結果:(1) 這些質體含有 F plasmid 的 OriT鹼基順序但只有45﹪類似,卻可由F協助傳遞,(2) 其他血清型中,鼠傷寒血清型與腸炎血清型之毒性質體亦含有與F OriT鹼基有Homology且比鳥類血清型之質體中之OriT sequence含量高,卻未能由F協助傳遞,(3)發見與其他血清型質體本身有高度的類似性。。我們推測,在這附近有OriT之序列。所以我們將此OriT的鹼基順序訂出來,以與F plasmid的,以及在其他血清型中之OriT序列比較。另外將繼續以DNA-DNA hybridization的方法訂出各質體互相間之類似性,以及查明類似領域中含有何種共同以及不同基因。

Project IDs

Project ID:PB8601-1198
External Project ID:NSC86-2314-B182-031
StatusFinished
Effective start/end date01/08/9631/07/97

Keywords

  • Salmonella
  • Gene map
  • Virulence plasmid
  • Gene function
  • DNA-DNA hybridization
  • Base sequence
  • DNA transfer
  • Macrophage

Fingerprint

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