Molecular Analysis of the Basic Replicon of pFW213, a Plasmid of Oral Streptococcal Origin

副嗜血鏈球菌是人體內附著能力最佳的細菌之一。此菌不單可附著在牙齒表面，並可成功地以生物膜的形態生存。當侵入具人工心臟瓣膜或瓣膜受損之人體內，副嗜血鏈球菌可經血液傳至心臟，並在瓣膜處形成菌落進而導致心內膜炎。本實驗室在菌株FW213 內發現一功能不詳，大小約7.0 kbp 之質體，命名為pFW213。初步分析顯示此質體含一個與其它利用theta 複製機制之質體相似的複製蛋白質和一負責質體移動(mobilization)之蛋白質。有趣的是此移動蛋白質多存在利用rolling circle 複製機制之質體，因此推測pFW213 在演化上可能由不同質體組合而來。由於水平式基因傳佈在生物膜的生態系統上具顯著意義，我們遠期目標在探討pFW213 對毒性分子在牙菌斑內散佈所扮演的角色。近期目標則在分析pFW213 的複製機制，及其在鏈球菌分子分析系統上的運用。預定目標：1. 定序pFW213 並將所得序列與基因資料庫核對；2.分析pFW213 之基本複製單位及複製機制；3.設計以pFW213 複製單位為基礎之大腸桿菌/鏈球菌雙性載體，及可直接在口腔鏈球菌內表現之鏈球菌載體。我們也將針對pFW213之移動蛋白質加以分析，並設計利用此一特性之載體。此載體可將外來基因以移動方式傳入，故對不具天然轉性機制或電擊系統之鏈球菌極為重要。由此計畫所建立之新種遺傳工程分析工具將對研究口腔鏈球菌基因調控有顯著貢獻。

Project ID:PA9508-1452
External Project ID:NSC95-2311-B182-006