Promoter Hypermethylation of Wnt Inhibitory Factor-1 in Cells from Lung Cancer-Related Malignant Pleural Effusions---Clinical Significance and Interactions with Epidermal Growth Factor Receptor Mutations

非小細胞肺癌在全球均佔癌症死因之首位。有必要進一步去研究肺癌的致病分子機制以發展新的有效診斷方法及治療製劑。Wnt 信號及上皮生長因子接受體信號現已躋身肺癌分子研究最熱門的題材。這兩個信號路徑間的交互作用在腫瘤生成及對標的療法的抗藥性上扮演重要角色。許多研究報告發現在不同人類腫瘤（包括非小細胞肺癌）中都有Wnt 信號的不正常活躍。因甲基化而使第一Wnt 抑制因子不表達是造成肺癌病變中Wnt 信號不正常活躍常見且為重要的機制。第一Wnt 抑制因子啟動子的高度甲基化被發現在75~83%的非小細胞肺癌中，而正常組織則未被發現；同時甲基化特定PCR（MSP）可以靈敏且準確地在細胞中發現高度甲基化。因此，以MSP 來檢測肋膜液細胞的第一Wnt 抑制因子啟動子有無高度甲基化應是做為區分非小細胞肺癌所引起的惡性肋膜積液與非惡性肋膜積液的一個可行方法。在臺灣病人的非小細胞肺癌中有40~50%有上皮生長因子接受體突變，在肺腺癌此比例又更高！有上皮生長因子接受體突變的患者接受Gefitinib 治療的臨床表現，包括腫瘤反應、反應持續期、無惡化下的存活期以及整體存活期均顯著較佳。最近，我們研究29 個非小細胞肺癌併有惡性肋膜積液病人的上皮生長因子接受體突變。上皮生長因子接受體突變被發現存於41%的檢體中。在本研究計劃裡，我們將進一步檢測非小細胞肺癌引起惡性肋膜積液的細胞中上皮生長因子接受體突變與第一Wnt 抑制因子啟動子高度甲基化的可能關連。此外，在併有上皮生長因子接受體突變的非小細胞肺癌中，上皮生長因子接受體的持續磷酸化與Akt 的持續活化可能會持續抑制乙型糖原合成激素（GSK-3）的活性，並因而穩定細胞質的-catenin 而不受Wnt 信號調節。而且上皮生長因子接受體在引發cyclin D1活性上又強於-catenin。綜合之，有上皮生長因子接受體突變的非小細胞肺癌中可能會有cyclin D1 的過度表現及GSK-3的活性減弱。由於兩者均為Wnt 接受體的下游作用物，我們因此推論Wnt 接受體的拮抗劑無法中止在有上皮生長因子接受體突變的非小細胞肺癌中依賴-catenin 的基因轉譯。我們將以RNA 干擾方式抑制Wnt 信號，來比較在有無上皮生長因子接受體突變的非小細胞肺癌的細胞增生、cyclin D1 表現與細胞凋亡。我們也將闡明相關的分子機轉。

Project ID:PC9508-1894
External Project ID:NSC95-2320-B182-057