Small Interfering RNA Targeting or Gene Transfer Enhanced Phosphoglycerate Kinase-1 in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma

  • Hwang, Tsann-Long (PI)

Project: National Science and Technology CouncilNational Science and Technology Council Academic Grants

Project Details

Abstract

胰臟惡性腫瘤一直居國內惡性腫瘤發生率第十~十一位,病患的五年存活率平均僅有5~10%。病人即使僥倖能接受開刀切除後,其五年存活率也僅有約15~20%。雖然對於胰臟惡性腫瘤的分子生物學研究過去一直僅限於DNA 或mRNA 的層次,但這也只能對突變基因的蛋白質產物得到部份瞭解。因此為了更深入瞭解惡性胰臟腫瘤病患體內相關基因表現改變,以及造成的蛋白質變化,應用蛋白質體分析對腫瘤細胞不同表現的分析研究,將會是十分可行及先進的方法。我們在過去四年來, 利用基因體技術的研究已發現GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase)、GDNF、PSA、TFIIH、PGER、Grancalin、HMG、以及PGK-1(Phosphoglycerate kinase-1 )等基因會在胰臟癌組織中呈現較強的表現反應。同時我們進一?以蛋白質體分析蛋白質點表現的差異,發現PGK-1 基因所表現的蛋白質phosphoglycerate kinase-1 一直在胰臟惡性腫瘤的2D 膠質電泳片上呈現異常顯現點。為進一步確定此蛋白質的表現,我們以雷射捕捉微分析儀(Laser capturemicrodissector) 將胰臟腫瘤細胞作精細收集後,以西方墨點分析可以證明PGK-1 在腫瘤細胞呈現較明顯的反應。另外以我們再以免疫化學染色方法(Immunohistochemicalstaining) 也可有意義的在腫瘤細胞呈現PGK-1 抗體的表現染色。此外由腫瘤銀行所收集的三十三位胰臟惡性腫瘤病患的血清,以ELISA 方法測定顯現其平均血清值也較非腫瘤病患的血清值有意義的較高。PGK-1 在惡性胰臟腫瘤的表現意義由上述研究可得明証, 本研究在目前醫學文獻上尚無類似的發表, 不過我們的研究論文已經被「Proteomics」雜誌接受刊登。未來兩年,我們的研究計劃將繼續利用本校核心蛋白質體研究室的設備,分析有關胰臟癌細胞的PGK-1 蛋白質表現意義,及腫瘤銀行儲存的胰臟惡性腫瘤及其他惡性腺性腫瘤等病人之相關生物資訊分析比較;此外我們再以siRNA 來抑制此蛋白質或以PGK-1 cDNA 轉在腫瘤細胞的表現,並比較其對胰臟惡性腫瘤生長之影響。我們的第一年計畫將先繼續分析有關胰臟癌細胞的PGK-1 蛋白質表現意義,及腫瘤銀行儲存的胰臟癌及其他惡性腫瘤等病人血清內PGK-1 之生物資訊作分析比較;再以siRNA 來抑制此蛋白質表現,植入於胰臟惡性腫瘤細胞株,然後種植於裸鼠皮下,比較對胰臟惡性腫瘤生長之影響;並且作免疫組織染色及蛋白質體分析,用2D 膠質電泳及MALDI-TOF 質譜儀分析兩組細胞之蛋白質表現差異。第二年計畫將以PGK-1 cDNA轉染裸鼠皮下之胰臟惡性腫瘤細胞,再比較腫瘤長出的大小,並作免疫組織染色及蛋白質體分析,用2D 膠質電泳及MALDI-TOF 質譜儀分析兩組細胞之蛋白質表現差異。希望能更瞭解肯定PGK-1 對胰臟惡性腫瘤的影響及其機轉,進一步發展出治療的新藥或診斷方法,而能對此類病患提供更新的診斷及治療新希望。

Project IDs

Project ID:PC9508-0873
External Project ID:NSC95-2314-B182-024-MY2
StatusFinished
Effective start/end date01/08/0631/07/07

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