Study of the Relatedness of the Expression among Antibiotics Resistant Genes, Sigma B and Virulence Factors in Staphylococcus aureus

乙內醯胺(β-lactam) 類抗生素如甲氧苯青黴素(methicillin) 曾經是用來對抗金黃葡萄球菌最有利的武器，而對甲氧苯青黴素具抗藥性的金黃葡萄球菌(MRSA) 出現，成為現今世界各大醫院感染控制上所面臨的嚴重問題之一，醣勝類抗生素如萬古黴素成為對抗MRSA 的最後防線選擇。但2002 年美國首先在不同臨床病人上分離出兩株對萬古黴素具抗藥性的金黃葡萄球菌(VRSA)，檢體中尚同時存有對萬古黴素具抗藥性的腸球菌(VRE)，後來的研究證實這兩株VRSA 是從同檢體中的MRSA 獲得來自VRE的抗萬古黴素的基因組。本計劃將著重在下列幾項議題的探究：1. 瞭解抗萬古黴素基因組由VRE 傳遞至金黃葡萄球菌的機轉與限制；2. 探究萬古黴素所引發的訊號傳遞途徑；3. 尋找在金黃葡萄球菌中和萬古黴素基因組相似的基因；4. 探究萬古黴素是否為影響σB 表現的刺激源；5. 瞭解在萬古黴素刺激下，VRSA 中受到σB 影響的致病因子表現狀況。我們將利用分子及細胞生物技術、生化方法、表面電漿共振、金黃葡萄球菌基因微陣列晶片、即時PCR 及蛋白質體學的分析來探索上述研究議題。目前，我們已經成功的藉由MRSA 和VRE 的細菌接合實驗得到VRSA 菌株。為了監控σB 的表現，現今正將一個直接受到σB 調控的asp23 基因之啟動子區域接合在lux 的基因表現報導系統上。為了評估不同金黃葡萄球菌菌株的致病性，已經建立利用trypan blue 染劑及受損的感染細胞所釋放出的乳酸脫氫.含量來檢測致病程度。我們希望本研究可以對VRSA 所造成的感染危機控制有所幫助。

Project ID:PC9607-0307
External Project ID:NSC96-2320-B182-014-MY3