建立抗雨傘節蛇毒血漿製程內力價測定方法取代動物檢定實驗

研究計畫: 衛生福利部(原衛生署) 衛生福利部委託研究

研究計畫-專案詳細資料

摘要

台灣疾病管制署以小鼠體內試驗來檢測免疫馬匹的血漿效價,判定馬匹體內抗體受是否已達製造抗蛇毒血清的階段,此方法已經行之有年。然為遵循動物實驗取代、減量、優化的3Rs原則,我們計畫研發出一個使用酵素結合免疫吸附分析法(ELISA)來檢測馬血漿中抗雨傘節蛇毒血清效價的替代方法學,藉此優化血清製程並減少實驗動物的使用。首先,對粗蛇毒進行二維液相層析分離純化出個別蛇毒蛋白質標準品,並以質譜學方法鑑定雨傘節蛇毒中個別蛋白質身份;接著,採用毒力分數的計算公式,量化篩選出對致死性貢獻最多的數種致死蛋白質,再以生物資訊平台分析這些蛋白質的立體結構、親疏水性、B細胞表位等性質來找出致死蛋白質的致毒位點,並且製造出這些位點的衍生胜肽。最後,將找到的致毒(死)蛋白質與衍生胜肽,導入本研究單位先前建立的馬血漿效價檢測ELISA平台中,開發出判定馬血漿對雨傘節蛇毒蛋白質免疫辨識效力之ELISA試劑。此試劑將接受馬血漿檢體測試,找出與中和效價最有關係之抗原組合與分析判定流程,取代傳統小鼠體內試驗,成為血清製程中檢測馬血漿效價迅速、低成本、且顧及動物福祉的檢測方法。

Project IDs

系統編號:PG11001-0024
原計畫編號:MOHW110-CDC-C-114-000109
狀態已完成
有效的開始/結束日期01/01/2131/12/21

Keywords

  • 生物技術(醫)
  • 小鼠體內試驗
  • 抗蛇毒血清製造
  • 酵素結合免疫吸附分析法
  • 動物福祉
  • 雨傘節蛇毒

指紋

探索此研究計畫-專案觸及的研究主題。這些標籤是根據基礎獎勵/補助款而產生。共同形成了獨特的指紋。