探討cGMP在肥大細胞去顆粒化作用的功能

肥大細胞（mast cells）和許多不同的生理功能有關，從維持血流系統的恆定到組織損傷與修護，過敏性發炎以及宿主防禦功能等。肥大細胞會合成與分泌多種不同的介質（mediators），來活化或調節鄰近細胞的功能，進而啟動複雜的生理變化。由肥大細胞或周圍鄰近細胞釋放的一氧化氮（nitric oxide）被證實可以調節肥大細胞的功能。在許多細胞中，一氧化氮會經由活化soluble guanylate cyclase (sGC)，來分解GTP 產生cGMP。一氧化氮經由增加細胞內cGMP 含量可以調控許多生理功能，例如：血管平滑肌鬆弛反應、神經突觸的傳導作用及血小板凝集等。可是sGC在肥大細胞的活性與cGMP在肥大細胞去顆粒化功能的角色則不清楚。在我們尚未發表的數據中發現兩種sGC 活化劑YC-1 與Bay 41-2272 都可以濃度相關的方式抑制抗原(DNP-BSA)誘發肥大細胞（RBL-2H3）釋放β-hexosaminidase 的反應。所以，在本計畫裡我們將進一步利用YC-1與Bay 41-2272 探討sGC 在肥大細胞的活性與去顆粒化功能。當肥大細胞受抗原活化時，FcεRI 會經由交互連結來吸引與活化tyrosine kinase Lyn 與Syk，接著磷酸化FcεRI γ-chain啟動下游訊號分子磷酸.C（phospholipase C）磷酸化，進一步使得細胞膜上的phosphatidylinositol (4,5)-bisphosphate 水解 ，產生三磷酸肌醇（inositol trisphosphate；IP3）與甘油二脂（diacylglycerol）。IP3 會與細胞中的鈣離子儲存器（內質網）上的接受器結合，使得細胞內鈣離子儲存器中的鈣離子被大量釋出於細胞質中，導致細胞內的鈣離子濃度增加。鈣離子的增加在肥大細胞去顆粒作用中扮演重要的功能，但是關於鈣離子下游的分子機轉則並未被清楚研究。有趣地，鈣離子增加劑A23187 與thapsigargin 誘發肥大細胞（RBL-2H3）釋放β-hexosaminidase 的反應會被YC-1 與Bay 41-2272 抑制。所以，希望本計畫的執行不僅可以瞭解sGC/cGMP 在肥大細胞的活性與去顆粒化功能，也有助於釐清YC-1 與Bay 41-2272 在鈣離子誘發肥大細胞去顆粒作用的下游分子機轉。

系統編號:PC9308-2064
原計畫編號:NSC93-2320-B182-044