從基因表現到超基因的層面來探討在經由膽管結紮所引起的肝硬化中TGF BETA 1所扮演的角色

β1-轉化生長因子(TGF-β1)，是一種廣泛分佈在組織的胜肽，並且具有多樣的生物活性。TGF-β1可以調節上皮細胞、間質幹細胞及免疫活性細胞的增生。TGF也會對細胞外基質的沉積及纖維母細胞的增生有刺激性的結果。這些作用在典型的受傷組織修補中都可以發現。抑制肝細胞的再生是TGF-β1重要的生物活性之一。因細胞外基質蛋白質的沉積，而使得肝臟慢性損壞，進而造成的肝硬化，是大部份慢性肝病的特徵。在許多纖維組織中常可以發現高濃度的TGF-β1。在實驗動物中，將外源性的TGF-β1送入組織中會造成嚴重的組織纖維化，同時也可見到肝臟的纖維化。而這可以幫助我們對TGF-β1的作用及肝臟纖維化機轉的瞭解。這些研究確立了TGF-β1在病變性纖維化中當作主要調節者的角色。在另一方面，DNA甲基化狀態的改變及組織蛋白的修飾已經在許多肝臟疾病中發現。目前在所感興趣的”甲基化所扮演的角色”這方面，已經專注於不正常的甲基化的事件之中。而這種經由去甲基化或默化超甲基化所造成的不正常甲基化作用，則會促使和再生，發炎和硬化相關重要基因的活化。在DNA甲基化區域的定位，主要依靠南方雜交法；其次為使用在經由重亞硫酸鹽化學處理後，將胞嘧啶置換為尿嘧啶的聚合酵素連鎖反應法(PCR)。在我們的計劃中，我們會建立TGF-β1在膽管阻塞後表現的時程,再藉由北方墨點法及原位雜交法， 在膽管阻塞的老鼠肝臟中檢測TGF-β啟動子的甲基化狀態和其穩定表現之間的關聯性。之後，在未經手術及膽管阻塞損傷的老鼠中，再經由原位雜交法及高敏感度的甲基定位法，來分析TGF-β和其它相關基因 TGF-β R1,TGF-β R2, smad分子群, THBS1的共同表現。

系統編號:PC9808-0535
原計畫編號:NSC98-2314-B182-027-MY3