丹參保肝、抗病毒及抗癌之機制探索

隨著中草藥國際認知程度及相關研究水準地不斷提升，近年來不論國內外積極從其中開發出低毒性、高療效且符合經濟原則的藥理活性成分。就目前而言；特別針對國人特有的疾病－肝功能疾病或障礙，期能在種類繁多的中草藥中開發出具保肝功能的中藥並進一步探討其有效藥理成分及功能基因。丹參屬鼠尾草科植物根莖，為現代醫學最常研究之傳統草本藥物之一，近來對丹參的作用研究主要集中在改善心、肝、肺、腦等臟器的缺血再灌流損傷及心血管疾病或障礙。其提取的化學成分，有脂溶性的二.類和水溶性酚酸類。本計畫預定以三年時間建立完整的丹參保肝及抗癌機制；計劃目標如下列：1. 體外生物活性篩選 – 使用數種肝癌細胞株(HepG2、3B、3BT2 及 Huh7 等)，分以MTT測量其抗癌、抗病毒功能並以逆轉TGF-B1 纖維化機制為保肝生物活性指標，最後以LDH評估其毒性。2. 生物活性機制探索–藉由affymatrix oligonucleotide 微陣列晶片、二維電泳及質譜儀等技術來研究細胞內基因與蛋白質相互關聯路徑。3. 細胞胞器分離– 氧化壓力與粒線體及肝癌發生有密不可分的關聯，需將細胞胞器分離深入探索，釐清其作用機制。4. 利用siRNA 驗證相關基因/蛋白質之交互作用–將特定siRNA 送入肝癌細胞株後，施以丹參活性成份處理，藉以研判此基因/蛋白質所扮演角色。5. 保肝之動物療效–DMN 處理老鼠之肝纖維化，建立丹參保肝療效、安全性與作用標的。6. 肝癌動物 (xenografts)–肝癌細胞株經由皮下注之免疫缺陷小白鼠，經丹參活性成份處理後觀察其癌症部位大小，並以免疫組織染色法、微陣列晶片、二維電泳及質譜儀等分析相關路徑。7. 標的追蹤之探索–使用biotin 標的來追蹤生物活性化合物於動物體內之代謝路徑。8. 丹參系統生物學–分別將丹參化學組成分、活性、細胞與動物反應依次輸入電腦，利用線性關係設計程式，建立系統生物學網路。本計畫將整合基因、蛋白質、生物資訊及代謝體學研究丹參二級代謝產物之生合成和有效成份，希望對未來中醫藥之應用有所助益。

系統編號:PC9607-0718
原計畫編號:NSC96-2320-B182-023-MY2