研究計畫-專案詳細資料
摘要
血小板在週邊血中是第二多的血液細胞。適當調控血小板的活化對維持血液正常的凝集相當重要。其中凝血酶活化血小板的訊息傳遞路徑在正常凝血或不正常血栓的形成都扮演重要的角色。雖然凝血酶誘導的訊息傳遞路徑已有多年的研究,但其中的調控機制尚未完全瞭解。我們長期研究的一個血小板蛋白Disabled-2 (DAB2)已知參與在血小板內吞纖維原蛋白的作用上並影響血小板的功能。在DAB2 基因剃除小鼠的研究中發現,DAB2 的缺失可影響小鼠的凝血與血栓的形成、及其他血小板的功能。其主要的作用機制是DAB2 的缺失影響了凝血酶的訊息傳遞路徑進而降低小鼠血小板對凝血酶誘導的功能。由於小鼠與人類血小板的凝血酶訊息傳遞存在一些分子上的差異,DAB2 在小鼠與人類血小板的表現量或isoform 的表現上也不一樣,因此,人類血小板中的DAB2 是否扮演與小鼠DAB2 同樣的角色並不清楚。我們最近的研究發現人類血小板的DAB2 會因凝血酶的刺激而在Ser723 的位點進行磷酸化。這個特異性磷酸化的位點在小鼠與大鼠DAB2 胺基酸序列中皆不存在,顯示凝血酶誘導DAB2-Ser723 的磷酸化是人類血小板演化後才產生的。這是我們知悉的第一個凝血酶活化血小板過程中DAB2 磷酸化的位點。然而到目前為止,我們對這個磷酸化的功能與其如何被磷酸化並不清楚。因此,我們將推動本計畫的執行以瞭解DAB2-Ser723 的磷酸化在in vivo 與in vitro 的血小板功能及凝血酶訊息傳遞所扮演的角色。在第一及第二年,我們將製作專一性抗DAB2-Ser723磷酸化的抗體以偵測DAB2-Ser723 的磷酸化,並藉以確認該磷酸化在不同血小板活化路徑上的變異情形。我們也將利用具細胞穿透性的R9-peptide 輸送具DAB2序列的短胜肽鏈進入人類血小板中,抑制凝血酶誘導DAB2-Ser723 的磷酸化,並進一步探討該磷酸化對血小板功能與凝血酶訊息傳遞路徑的影響。在第三年,我們將進行基因轉殖與小鼠骨髓移植的實驗,使小鼠的血小板表現人類的DAB2 蛋白,藉以探討人類DAB2 及Ser723 突變的DAB2 蛋白在in vivo 與in vitro 血小板功能及凝血酶訊息傳遞的影響。我們預期這個計畫的完成可以協助我們更瞭解凝血酶活化血小板的調控及DAB2-Ser723 磷酸化的生理與細胞學上的意義。這些研究成果對於血小板的生理與相關疾病的發生可提供新的思考方向。
Project IDs
系統編號:PC10301-0137
原計畫編號:NSC102-2628-B182-009-MY3
原計畫編號:NSC102-2628-B182-009-MY3
狀態 | 已完成 |
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有效的開始/結束日期 | 01/08/14 → 31/07/15 |
Keywords
- 醫學技術
- 生物技術(醫)
- 血小板
- Disabled-2
- 磷酸化
- 血液凝集
指紋
探索此研究計畫-專案觸及的研究主題。這些標籤是根據基礎獎勵/補助款而產生。共同形成了獨特的指紋。