Dlk1/Pref-1在神經母細胞瘤血管新生之功能性研究

Dlk1/Pref-1 最初被稱為前脂肪因子(preadipocyte factor-1)，可抑制前脂肪細胞3T3-L1分化為脂肪細胞。它是一個穿越細胞膜的蛋白，屬於類上皮生長因子衡定家族，此家族包含Notch、Notch 的ligands (Delta 與Serrate 和它們在哺乳類的同系物Dll 與Jagged)、以及Dlk1/Pref-1。Notch 訊號傳遞路徑對正常組織的發育與衡定極為重要，而最近發現Notch 對於血管發育及腫瘤血管新生也不可或缺。阻斷Notch 的ligand Dll4 會導致腫瘤血管明顯增加，且其出芽與分枝也增多，但奇怪的是這些增生的血管因血液灌注不佳而沒有作用，腫瘤生長也因此受限。神經母細胞瘤是一種臨床表現紛雜的兒科腫瘤。血管新生對於此腫瘤的生長頗為重要，並與後期腫瘤及好侵犯的預後相關。有文獻顯示，Notch 訊號傳遞與神經母細胞瘤的細胞分化及血管新生有關。雖然已知Dlk1/Pref-1 在某些神經母細胞瘤會有高度表現，然而其作用仍然不明。最近有人發表Dlk1/Pref-1 可藉由特別的類上皮生長因子重覆序列與Notch 互動，來抑制Notch 活化。再者，我們先前的研究顯示Dlk1/Pref-1 在神經母細胞瘤的內皮細胞上有過度表現。因此我們的假說是：Dlk1/Pref-1 與Notch 訊號傳遞間的互動，對於神經母細胞瘤的腫瘤血管新生可能非常重要。在前期研究中，我們已經發現Dlk1/Pref-1 的細胞外區塊(Dlk1-EC)之合成蛋白能在體外促進內皮細胞的增生與移行，而在大鼠眼睛的測試也顯示Dlk1-EC 有促進血管新生的作用。為了進一步了解Dlk1/Pref-1 在神經母細胞瘤的血管生長之作用，我們提出此計劃，藉由Dlk1/Pref-1 過度表現與抑制表現的狀況下，以神經母細胞瘤細胞株作體外研究，並將此腫瘤細胞株施打於裸鼠皮下，以進行體內研究，來回答下列問題：1) Dlk1/Pref-1 過度表現或抑制表現會影響神經母細胞瘤細胞株血管新生的活性嗎？2) 在神經母細胞瘤細胞中，Dlk1/Pref-1 表現之改變與Notch 訊號路徑之間如何互動？3) Dlk1/Pref-1 過度表現或抑制表現可造成神經母細胞瘤細胞株整體mRNA 何種改變？4) 神經母細胞瘤的生長與血管新生是否受到Dlk1/Pref-1 過度表現或抑制表現的影響？5) Dlk1/Pref-1 過度表現或抑制表現若造成腫瘤血管增生，這些增生的血管是否有用？6) Dlk1/Pref-1 過度表現或抑制表現可造成神經母細胞瘤的整體蛋白表現何種改變？這個研究的結果將有助於了解Dlk1/Pref-1 與Notch 訊號路徑間的相關性，並明瞭Dlk1/Pref-1 在神經母細胞瘤血管新生的角色。這些結果將對於未來發展抗血管新生療法，以治療神經母細胞瘤甚至是其他惡性腫瘤，具有潛在的助益。

系統編號:PC9808-0540
原計畫編號:NSC98-2320-B182-023-MY3