原發性造血不良症候群之基因變異和其在疾病惡化的角色

研究計畫: 衛生福利部(原衛生署) 衛生福利部補助研究

研究計畫-專案詳細資料

摘要

造血不良症候群(myelodysplastic syndrome)是單源性造血幹細胞異常的多樣性疾病族群,臨床特徵為無效造血、頑固性血球降低,以及易於轉化為急性骨髓性白血病。造血不良症候群的分子病因,和由造血不良症候群惡化為急性骨髓性白血病的分子機轉,至今大多未知。以前文獻上對於造血不良症候群的基因變異的研究,多限於在造血不良症候群最初發病時,或只在已經惡化成急性骨髓性白血病時。且之前的研究,大部份病人為化學治療或輻射後引發的次發性疾病。過去並未有系統化的研究,來比較同一位病人在造血不良症候群初診斷以及在轉化成急性骨髓性白血病時的基因異常。在本計畫,我們將分析同一病人在造血不良症候群和轉化為急性骨髓性白血病時的成對檢體,以求對由造血不良症候群惡化為急性骨髓性白血病的病因學,獲得更多瞭解。我們的目的是(1)探知原發性造血不良症候群在初發病時的多樣基因變異,包括receptor tyrosine kianse (RTK)/tyrosine kinase/Ras訊息傳遞路徑、造血轉錄因子(transcription factor)、抑癌基因變異(突變或甲基化)、致癌基因的過度表現,和MLL基因擴增;並且釐定這些基因異常,在造血不良症候群惡化為急性骨髓性白血病時所扮演的角色;(2)釐清基因間協同突變(cooperating mutations)的樣式;(3)分析基因異常、染色體變化、臨床血液學特徵和預後間的關聯性;(4)探究新發現的基因變異之生物學功能,及基因協同變化能否造成白血病。 自從1991年以來,新診斷的成人原發性造血不良症候群初診斷及惡化為急性骨髓性白血病時的骨髓檢體,均即冷凍貯存,這使我們能夠有系統地,且快速地研究其基因變異。我們將以DNA/cDNA PCR後作直接定序或用變性高效液相色層技術 (denaturing high-performance liquid chromatography)分析,再以定序來確認各種基因突變。將以bisulfite-pyrosequencing分析法來定量抑癌基因或啟動子的異常甲基化。MLL基因的擴增將以螢光原位雜交技術(FISH)分析,並以即時定量聚合酶連鎖反應(RQ-PCR)來測量EVI-1和HOX基因的表現量。對新發現的AML1基因變異,將以蟲螢光素酶報導基因測試(luciferase reporter assay)來檢測其活化基因表現的活性,以酵母菌雙雜交篩選測試(yeast two-hybrid assay)來分析與其作用的蛋白,並進一步以電泳雙雜交篩選測試(electrophoresis mobility shift assay)來驗証。新的AML1基因異常及AML1和N-Ras的協同基因異常可否引起白血病,將以反轉病毒轉導作用/移植作用(retroviral transduction/transplantation)來檢驗。 對造血不良症候群病人在初診斷和在惡化為急性骨髓性白血病時,鑑定其各種基因變異,能進一步瞭解有關造血不良症候群的發生及惡化的病因。測定基因變異另一個目的是,將來以此鑑認出病人可用各種不同的標靶治療。本計畫的研究成果預期可立即應用於臨床,並提供有價值的知識以進一步對白血病的病因做生物學上更深入的研究。

Project IDs

系統編號:PG9703-0131
原計畫編號:NHRI-EX97-9711SI
狀態已完成
有效的開始/結束日期01/01/0831/12/08

Keywords

  • 臨床醫學

指紋

探索此研究計畫-專案觸及的研究主題。這些標籤是根據基礎獎勵/補助款而產生。共同形成了獨特的指紋。