由天然物開發具新穎性的嗜中性白血球FPR1拮抗劑

過度或不當活化的嗜中性白血球（neutrophils）是造成發炎疾病相關組織傷害的主要貢獻者。因此，發展可以抑制過度或不當活化的嗜中性白血球藥物是改善發炎症狀的有效方法；儘管如此，臨床上可用來直接調節嗜中性白血球相關的發炎症狀之藥物仍然很少。所以，本計畫的目的是為了研究和發展新一代治療嗜中性白血球相關發炎疾病的抗發炎藥物。內生性或是外生性的化學趨化物（chemoattractants）會使嗜中性白血球活化。其中，formyl-L-methionyl-L-leucyl-L-phenylalanine (fMLP)是一種被研究最多也被認定是最重要的化學趨化物。fMLP 是源自微生物的甲醯化胜肽（formylated peptides）原型物。重要地，研究指出粒線體會製造甲醯化胜肽，而且當粒線體損壞時會將甲醯化胜肽釋放；這些實驗說明甲醯化胜肽不僅是外生性的化學趨化物，而且也是內生性的發炎訊號物質。這類甲醯化胜肽是透過和嗜中性白血球上的formyl peptide receptor (甲醯胜肽接受體；FPR) 結合，來產生細胞分子反應與細胞功能表現。人類嗜中性白血球表現的甲醯化胜肽接受體包括FPR1 和 FPR2，其中FPR1 是fMLP 的高親和性（high-affinity）接受體。基於FPR1 在發炎相關疾病的重要性與發展FPR1 拮抗劑的需要性，我們以人類嗜中性白血球的實驗模式，篩選了超過500 種天然物的萃取物，找尋有潛力且具選擇性的FPR1 抑制劑。其中，金絲桃科福木Garcinia multiflora (Guttiferae) Champ 果實的萃取成分(GMC)具有最強抑制fMLP 活化人類嗜中性白血球釋放超氧自由基和彈力蛋白酶的作用，其IC50 值分別為3.060.50 和4.340.95 ng/ml。初步的實驗發現，GMC 不僅會抑制fMLP 所引起的細胞內鈣離子濃度增加的現象，也會抑制ERK、p38 MAPK 和JNK的磷酸化反應。相反地，GMC 無法抑制由protein kinase C 活化劑和FPR2 作用劑刺激嗜中性白血球所產生的細胞變化。特別的是，在接受體結合實驗中，GMC 具有濃度相關性的抑制fMLP 結合在接受體FPR1 的能力。以上初步結果顯示，植物萃取物GMC具有選擇性與強效性的抑制FPR1 接受體，具有開發成為治療嗜中性白血球相關發炎疾病藥物的潛力。G. multiflora 內含有benzophenones, xanthones, flavonoids, isocoumarins,steroids 等成分。不過，現今對於G. multiflora 的抗發炎功效與其有效成分仍不清楚。在這個計畫中，我們將以人類嗜中性白血球的體外實驗模式和兩種多重器官功能障礙的體內動物模式來評估GMC 的抗發炎功能，並進一步以活性與機制為導引的分離和純化技術來探討GMC 抗發炎的有效成分。同時也將研究GMC 有效成分的新穎藥理作用機轉，並分析與評估它們作為抗發炎藥物先導化合物的可能。

系統編號:PC10007-0346
原計畫編號:NSC100-2628-B182-001-MY3