番茄素及番茄素定對睪丸萊氏細胞睪固酮分泌之影響

番茄素及番茄素定為由綠番茄分離之固醇類生物鹼，前人研究指出番茄素及番茄素定具有抑制黴菌感染，降低人體血中膽固醇及三酸甘油、增強免疫力、抗發炎及抗癌等效果。但其對生殖內分泌系統，如，睪酮之分泌及作用機制仍屬未知。Regucalcin(RGN) 為一個可與Ca++結合之蛋白質，其蛋白質存在於肝及腎最多，亦存在生殖相關組織，如攝護腺、卵巢、乳房及睪丸的Leydig cell 和精子；Sirtuin為silencing information regulator protein-2(Sir2)相關的蛋白質，為一種NAD+ -dependent histonedeaceylase；人體內有7 種sirtuins(SIRT1~SIRT7)。SIRT1 及SIRT2 存在於細胞質及核內，睪丸亦有SIRT1；最近的研究顯示SIRT1 與雄鼠生殖能力相關，具有抗發炎之效果。這些研究顯示RGN 及SIRT可能在生殖內分泌、Leydig cell 分泌睪酮及精子成熟方面扮演一特定功能。此外，許多研究顯示黃酮類物質會抑制免疫或內分泌系統功能。但，就PI 所知，番茄素定和檳榔鹼(Am J Physiol EndocrinolMetabol. 2008, 295:E497-E504)——兩種從植物純化而來之物質——目前已知的少數兩種植物純化物，則會刺激Leydig cells 分泌睪酮。本三年計劃之主要目標為：(1)〉探討番茄素及番茄素定對萊氏細胞株TM3 睪酮分泌、MAPK 磷酸化、固醇生成酵素、SIRT 及RGN 訊號傳導之影響；(2)以離體大雄鼠萊氏細胞為模式，觀察番茄素及番茄素定對睪酮分泌及訊號分子及mRNA 的表現；(3)探討番茄素及番茄素定對於活體大鼠於不同年齡層及口服後長期及短期之影響。TM3 及分離之萊氏細胞將培養於RPMI-1640 液體並以不同濃度之番茄素及番茄素定處理。不同年齡層1、2、6、及12 月大的雄鼠—24月齡無處可購，自養則費用太高—口服番茄素及番茄素定1 或14 日後犧牲；血漿及細胞培養液中的睪酮及LH 將以ELISA 測定；訊號分子，包括SIRT、RGN、MAPK 及酵素則以Western blot 檢測；酵素、SIRT 及RGN 之mRNA 表現將以RT-PCR 測定。初步結果發現番茄素定促進TM3 細胞分泌睪酮(Fig. 1)，TM3 細胞表現SIRT1、SIRT2、及RGN 蛋白質(Fig. 2)，以番茄素定處理TM3 細胞6 小時後增強睪酮分泌(Fig. 4)，番茄素及番茄素定可刺激經hCG 處理過的大鼠萊氏細胞分泌睪酮(Fig. 5)，而番茄素定會增強TM3 細胞表現P450c17 酵素蛋白的表現(Fig. 6)。期望此研究成果能提供相關資訊以瞭解番茄素及番茄素定對人體保健之影響。

系統編號:PB10408-6661
原計畫編號:MOST104-2320-B182-012