利用破壞同源基因功能的方法來搜尋及鑑定人類細胞hTERT的抑制子(I)

端粒脢是一特化的核蛋白反轉錄脢，它含有一完整的RNA 並利用其內之一小段序列當模版來作為合成染色體末端重覆序列(TTAGGG 在人類細胞)。端粒脢之活性在正常人類的體細胞是被阻遏的，但在癌細胞及永生的細胞則被活化，因此此酵素在細胞之永生化及致癌過程扮演一重要角色。許多研究結果指出，人類端粒脢反轉錄脢(hTERT)的表現為調節端粒脢活性的主要機制。雖然hTERT 基因的表現已有許多的活化因子與抑制因子被鑑定出來，然而吾人對於此酵素在正常人類細胞內的調控瞭解仍很有限。目前已有的證據認為正常細胞內存在一負調節的機制。因此，為了更進一步去探究正常細胞內端粒脢的調節，找尋並鑑定出在正常生理狀況下所存在的抑制因子也就顯得相當重要。在本計畫裡，我們將使用functional homozygous knock-out 的方法，直接由正常細胞內找尋hTERT 抑制因子。我們會進一步鑑定並研究這些抑制因子在正常細胞與癌細胞內如何參與調節hTERT 基因的表現。我們預期由此方法所獲得的抑制因子，應為存在於人類正常體細胞內的真實抑制因子，此結果將可大幅提升吾人對於人類細胞在端粒脢活性調控的機制。

系統編號:PA9308-1833
原計畫編號:NSC93-2311-B182-003