空腸餵食捐贈者脾臟細胞對於複合性組織移植之抗排斥效用及CD4+CD25+調節性T淋巴球所扮演的角色

複合性組織移植是指移植的組織是由多種不同的組織所組成，例如手或喉頭手術，此種複合性組織移植手術在顯微重建手術的領域裡提供了很好的應用性。但是接受者需要長期服用廣效型抗生素，而且會有相關的的副作用產生。此外，即使病人持續使用抗生素，移植的組織還是會出現慢性排斥反應。因此如何調控接受者的免疫反應使其對於捐贈者的組織不會產生排斥反應(即產生免疫耐受性)，是值得思考的方向。在臨床上，骨髓移植手術可以成功地改變接受者體內的免疫系統，接受者不會對捐贈者的骨髓產生排斥反應，目前此種方式已經應用在治療血液方面的腫瘤疾病。但是在進行骨髓移植的同時，接受者需要接受全身性放射線的照射，藉以破壞接受者本身的免疫細胞，這樣的方式並不適用於複合性組織移植手術。因此，研究人員試圖找尋其他可以改變接受者的免疫反應的方法。近年來有眾多的證據指出，口服某些抗原可以降低自發性免疫疾病的實驗動物或病人的自體免疫反應。此外，在實驗動物上，口服捐贈者的脾臟細胞也可以延長移植的器官(如心臟或腎臟)的存活時間。而且實驗動物在口服捐贈者脾臟細胞的同時，如果也同時口服捐贈者的肝臟細胞或術後三天再服用低劑量的環孢靈素(cyclosporine A) 都可以更加延長移植器官的存活時間。很多研究人員認為，對實驗動物而言，由口服捐贈者的脾臟細胞引起的接受者的免疫反應的改變，可能是接受者體內產生了一群具有免疫調節功能的T 細胞。因為此種具有免疫調節功能的T 細胞(CD4+CD25+ T cells)可以釋出降低免疫反應的細胞激素，如介白素-4、介白素-10 及腫瘤生長因子β。此外，有報告指出，對於實驗動物的移植器官的存活時間而言，相對於口服捐贈者的脾臟細胞所引起的效果而言，經由空腸餵食捐贈者的脾臟細胞所引起的效果會比較好。雖然很多報告指出，口服捐贈者脾臟細胞有可以有效地增加移植器官的存活時間，但截至目前為止，口服捐贈者脾臟細胞是否可以有效地增加移植複合性組織的存活時間以及可能的作用機制都還不清楚。為了探討這個問題，我們將使用主要組織相容性複合體不配對的大白鼠，例如以Lewis (LEW) 品種為接受者，而以Brown-Norway (BN) 品種為捐贈者。首先，我們會將合適的矽膠管放入接受者的空腸，然後將矽膠管固定在頸背部以方便餵食。經過一週的恢復後，我們將捐贈者的複合性組織(即腹股溝皮瓣)移植至接受者的腹股溝。手術後三天，接受者則開始接受肌肉內注射低劑量環孢靈素(2.5 mg/kg/day)。在第一年的計畫中，我們將使用四組LEW (見表一) 來探討，相對於只有由空腸餵食捐贈者的脾臟細胞的效果而言，同時餵食捐贈者的脾臟細胞及肝臟細胞是否可以更有效地延長BN 腹股溝皮瓣的存活時間。表一、接受BN 腹股溝皮瓣移植的LEW 大鼠有或沒有經由空腸餵食捐贈者的脾臟細胞(或肝臟細胞或兩者的混合細胞)接著在第二年的計畫中，我們將使用二組LEW (見表二) 來探討，如果空腸餵食捐贈者細胞可以更有效地延長BN 腹股溝皮瓣在接受者身上的存活時間，是否因為接受者體內大量產生一群具有免疫調節功能的T 細胞(CD4+CD25+ T cells)。表二、接受BN 腹股溝皮瓣移植的LEW 大鼠有或沒有經由空腸餵食捐贈者的細胞如果在第二年的計畫中發現，CD4+CD25+ T cells 的產生確實與BN 腹股溝皮瓣的存活時間有正相關性，接著第三年的實驗，我們將使用三組LEW (見表三) 來探討，由空腸餵食捐贈者細胞的LEW 分離出來的具有免疫調節功能的T 細胞(CD4+CD25+ T cells)，經由靜脈注射給LEW 後，是否也可以有效地延長BN 腹股溝皮瓣的存活時間。表三、接受BN 腹股溝皮瓣移植的LEW 大鼠有或沒有經由靜脈注射由一般LEW 或空腸餵食過捐贈者細胞的LEW 大鼠分離出來的具有免疫調節功能的T 細胞由我們的初步結果得知，相對於沒有餵食捐贈者脾臟細胞的LEW 所分離出來的T 細胞而言，由空腸餵食捐贈者脾臟細胞的LEW 分離出來的T 細胞對於BN 組織抗原所引發活化程度比較小。因為T 細胞對於他種組織抗原所引發活化程度是決定組織移植是否會發生排斥的主因之一，因此我們的初步結果顯示，對LEW而言，由空腸餵食捐贈者脾臟細胞應該可以有效降低BN 腹股溝皮瓣的排斥反應(即延長存活時間)。這個計畫可以幫助研究人員更加瞭解運用空腸餵食捐贈者脾臟細胞(或同時餵食捐贈者肝臟細胞)同時併用低劑量環胞靈素(手術後三天開始)可以有效地延長複合性組織移植的存活時間。而且，同時也可以幫助研究人員了解，具有免疫調節功能的T 細胞(CD4+CD25+ T cells)是否扮演重要的角色。

系統編號:PC9708-0074
原計畫編號:NSC95-2314-B182-019-MY3