D型肝炎病毒RNA重組之分子機轉---RNA二級結構及寄主細胞RNA聚合脢所扮演之角色

RNA重組（RNA recombination）為RNA病毒演化上一重要機制，依本實驗室先前研究發現（Wang and Chao. 2005. J. Virol. 79:2221-2229 and NSC 93-2320-B-182-025-)： D型肝炎病毒（hepatitis delta virus；HDV）也可進行RNA重組，且二病毒間RNA序列相似程度越高及複製能力越強，則RNA重組頻率越高；建議HDV RNA重組應由一與複製相關的機制來執行的，最可能的應為由寄主RNA聚合脢（RNA polymerases）參與的模板轉換機制（template switch mechanism）。且RNA重組後產生的重組分子只要維持住桿狀不分枝結構（unbranched rod-like structure），則仍具有複製能力，更證實RNA重組確實在HDV演化上扮演重要地位。基於這些研究成果，提出本計劃，以期能進一步瞭解HDV RNA重組之分子機制。研究目標分述如下：第一年探討HDV RNA分子上之二級結構在HDV RNA重組上所扮演之角色，可佐證HDV RNA重組是由一與複製相關的模板轉換機制來執行的。第二年利用對二方向性RNA基因體複製力有不同影響的突變株，配合加入不同濃度的α-amanitin，如果HDV RNA重組確實由寄主RNA聚合脢參與的模板轉換機制來執行的，則α-amanitin對這些突變株之二方向HDV RNA的重組機率應有不同的影響。第三年具有生存優勢的重組HDV分子，較易在細胞內被選擇出來。因此，持續表達二基因型HDV RNA的細胞株將被建立，二基因型RNA間所產生的重組分子隨時間而消長的現象將被分析，以期確認RNA重組對HDV演化的角色。

系統編號:PC9607-0311
原計畫編號:NSC96-2320-B182-011-MY3