卡波西氏肉瘤病毒溶裂生活史中 DNA 複製蛋白質的組裝調控研究

真核細胞DNA的複製是一個高度調控的過程, 在此過程中需要有多個複製蛋白質的參與和組裝。由於缺乏簡易的DNA複製研究模式, 目前對於真核細胞DNA複製的知識大部分仍來自於各類DNA病毒的研究系統。在本計畫中, 我們將以卡波西氏肉瘤病毒 (KSHV) 的溶裂DNA複製作為我們的研究模式。雖然疱疹病毒類的溶裂DNA複製已經被發現幾十年, 但對於如何調控複製蛋白質的組裝仍是未知。像其它疱疹病毒類的成員一樣, 卡波西氏肉瘤病毒具有六個同源的核心複製蛋白質, 其分別為 ORF6 (SSB,單股DNA結合蛋白質), ORF9 (POL,聚合酶), ORF40/41 (PAF,引子連接因子), ORF44 (HEL,旋解酶), ORF56 (PRI,引子酶), ORF59 (PPF,聚合酶連接因子)。基於目前的理論, ORF44 (旋解酶), ORF56 (引子酶), 和ORF40/41 (引子連接因子) 等三員, 被認為會組裝成一個三聚體; 而 ORF9 (聚合酶) 和 ORF59 (聚合酶連接因子) 則會組裝成一個雙聚體。在我們的初步研究中, 我們意外發現此病毒可能具有多種監督機制用以調節和控制核心複製蛋白質的組裝。當病毒核心複製蛋白質(或聚合單元), 若未能同步同量產生時, 這些調控機制將會啟動, 而影響特定核心複製蛋白質(或聚合單元)於細胞內的位置, 或改變其蛋白質的穩定性, 以及其它功能。若能充分了解這些病毒核心DNA複製蛋白質的協調性組裝, 此不僅能提供對病毒複製機制的深入認識, 此也有利於發展對抗病毒的新治療策略。綜合以上, 我們擬定了六個特定的子目標做為本計畫的研究方向。這六個特定的子目標分別為: (1)調查病毒核心複製蛋白質彼此之間相互結合的關係; (2)分析核心複製蛋白質多單元的協調性組裝機制; (3)探索特定核心複製蛋白質於細胞質內滯留的機制和重要性; (4)研究 ORF59 增加 ORF9蛋白質的量的機制; (5)調查 ORF44-ORF56-ORF40/41三聚體進入和輸出細胞核的機制; (6)尋找可能的藥物分子用以阻斷核心複製蛋白質的組裝。

系統編號:PC10907-0958
原計畫編號:MOST109-2320-B182-027-MY3