研究A型流行性感冒病毒RNA聚合脢中酸性蛋白對病毒複製與致病性之調控

A型流行性感冒病毒為人類呼吸道感染的主要病源之一，過去曾經造成嚴重的致死性疾病。在結構上，A型流行性感冒病毒內部由八段RNA基因體所組成，每段基因體上結合一個病毒RNA聚合酶複合體(RNA polymerase)及多個核蛋白(Nucleocapsid protein)。病毒RNA聚合酶複合體由三個蛋白組成，分別為PB1、PB2及PA蛋白。此RNA聚合酶除了負責病毒RNA的複製外，也有進行病毒基因轉錄合成mRNA的功能。在進行轉錄時，病毒聚合酶會結合並剪下一段10-13個核甘酸長的宿主細胞5’端mRNA及CAP結構，以此為病毒mRNA的5’端，並以病毒 vRNA為模板轉錄出mRNA。由於病毒RNA聚合酶負責病毒基因組之複製，研究顯示此聚合酶中的酸性蛋白(PA)與病毒顆粒複製和病毒致病力息息相關。本計畫將從比較轉染細胞中高致病力病毒之聚合酶與低病原性病毒之聚合酶活性研究起，進而建立細胞外生化實驗系統，以純化蛋白研究高病原性病毒聚合酶之活性，並找出PA蛋白上可造成聚合酶活性增加的區域，以及影響其RNA合成哪一步驟。再根據序列比較，找出可造成複製加快的個別胺基酸位點。此外，在人類細胞中進行病毒RNA聚合酶純化的同時，我們將同時尋找被一起純化的細胞或病毒蛋白，並測試這些蛋白對於病毒RNA聚合酶活性之影響及可能機制。此研究將有助於對抗流行性感冒病毒之藥物設計。

系統編號:PC10001-1164
原計畫編號:NSC100-2320-B182-001