研究宿主細胞蛋白對A型流行性感冒病毒RNA聚合脢之調控機制

本計畫為延續先前申請通過部分補助十個月(100/1/1~100/10/31)之新進人員計畫人類A型流行性感冒病毒感染人類呼吸道，為人類嚴重致病的感染源之一，過去曾造成數次世界性大流行。此病毒的基因組為八個片段之負股RNA，目前已知病毒可在感染細胞中製造出十一個病毒蛋白。其中PB1、PB2及PA蛋白形成病毒RNA聚合酶複合體，負責病毒基因轉錄作用，並與病毒核蛋白(nucleocapsid protein, NP)共同作用進行病毒RNA的複製。研究顯示病毒的RNA聚合酶與病毒複製速度及致病力息息相關。此外，在感染細胞中病毒會大量表現出第一非結構蛋白(Nonstructural protein 1, NS1)。此非結構蛋白具有多重的功能，其最主要功能是抑制細胞中的干擾素合成，進而有利於病毒在感染個體中複製及傳播。我們過去的研究發現，事實上這個非結構蛋白在感染細胞中也會與病毒的RNA聚合酶形成一個大的複合體，而且在此非結構蛋白的突變也會影響病毒的複製效率。所以此非結構蛋白也可能參與病毒RNA聚合酶之活性調控。我們過去的研究發現，高致病力病毒之聚合酶的活性比低病原性病毒之聚合酶要高出許多，而其決定因子可能位於PA蛋白的N’端區域上。本計畫將延續我們過去的發現，先以轉染系統以及重組病毒的方式，確認聚合酶蛋白上可造成活性增加的胺基酸位點。再以細胞外生化實驗系統，以純化蛋白研究高病原性病毒聚合酶之活性，以及這些位點之影響，並尋找其影響RNA合成之關鍵步驟。此外，我們也將鑑定在病毒RNA聚合酶複合體中存在的細胞蛋白，並研究這些蛋白對於RNA聚合酶活性之影響及機制。其中關於病毒的第一非結構蛋白如何影響流行性感冒病毒的RNA聚合酶活性，也將在本計畫中進一步研究。這些研究的成果將可以應用於未來設計與篩選對抗流行性感冒病毒之藥物標的。

系統編號:PC10101-2089
原計畫編號:NSC100-2320-B182-019-MY3