禽流感(H7N9)在人類呼吸道上皮細胞ex vivo Culture 及雪貂動物模式之複製及致病機轉研究---子計畫四-建立人類呼吸道上皮細胞ex vivo Culture平台---禽流感(H7N9)複製及藥物感受性與捐贈者的人類學特徵的關聯性(I)

背景：雖然新型A型禽流感（H7N9）病毒尚未在台灣造成大流行，但是天然宿主的存在與H7N9所造成的嚴重疾病凸顯了我們必須評估它對人類公眾健康的危害及明瞭其可能的致病機轉。根據中國衛生當局所進行的流病研究顯示， H7N9病毒似乎較常感染老年人，且在男性或罹患其他內科疾病的患者造成較嚴重的併發症。因此，我們假設H7N9病毒在具有不同人類學特徵之捐贈者的ex vivo培養呼吸道上皮的複製與藥物感受性會有所不同。 目的：我們目標建立一個包括人類上下呼吸道上皮細胞的完整ex vivo培養平台及比較不同年齡、性別、與內科共病組別上皮細胞的H7N9病毒複製與藥物感受性的差異。 材料與方法：這是一個前瞻性病例控制的兩年期研究。我們預定收集60個於103年1月1日至104年12月31日間接受上呼吸道或肺部手術患者的剩餘檢體進行呼吸道上皮細胞的ex vivo培養。這些病人係依據年齡、性別、與內科共病的條件而被招募。H7N9病毒將被接種到ex vivo培養中，然後以觀察細胞病變或即時反轉錄PCR法來決定上清液中造成50%細胞感染的病毒量（TCID50）來測量病毒複製。而oseltamivir的藥物感受性則以TCID50降低分析（TCID50 reduction assay）或即時反轉錄PCR法來加以決定。我們將更進一步的比較不同解剖部位、年齡、性別、或內科共病組別的病毒複製與藥物感受性之差異。 預期成果：本研究將能建立一個完整的人類呼吸道上皮細胞ex vivo培養平台以便能快速研究新興的傳染性疾病，和運用此平台來瞭解不同病人群的禽流感（H7N9）病毒的趨性、複製、及藥物感受性的差別。

系統編號:PC10304-0017
原計畫編號:MOST103-2321-B182-012