提升私校研發能量專案計畫---找尋與鑑定參與人類細胞癌化之分子---子計畫三：系統性分析鼻咽癌組織及含有EB病毒蛋白LMP1之人類細胞中與甲基化相關之特殊差異表現分子(I)

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma) 是一種轉移性很強的惡性腫瘤，其發生的原因與人類泡疹病毒科之Epstein-Barr 病毒(EBV) 關係非常密切。潛伏性膜蛋白壹(latentmembraneprotein 1, LMP1)是EB 病毒所製造出的一種致癌蛋白(oncoprotein)，於大部份鼻咽癌腫瘤組織中可以偵測出LMP1 的表現。LMP1 可以壓抑細胞中E-cadherin 蛋白的表現，而E-cadherin蛋白表現量的下降常常與細胞移動能力的提高同時出現。最近我們的研究發現，將LMP1表現於鼻咽癌細胞株中，可以增強DNA 甲基化酵素(DNAmethyltransferase, DNMT)的活性，同時使得E-cadherin 基因啟動子(promoter)部位出現過度甲基化(hypermethylation)的現象。另外，數種重要蛋白激脢訊息傳遞途徑已知受到LMP1 的調控，而DNMT 本身是以磷酸化蛋白形式存在細胞中。雖然這些現象背後的分子機轉未明，但已強烈暗示LMP1 可能透過調節DNA 甲基化酵素的活性來影響宿主細胞之基因表現。為了瞭解LMP1 在鼻咽癌形成及轉移過程中扮演的角色，以及找尋除了LMP1 以外之可能的新分子標誌(長程目標)，本計畫擬利用本校正在建構中之蛋白質體核心實驗室設備，在三年內針對下列目標進行探討：(1) 分析鑑定LMP1 表現的細胞中，可以與DNA 甲基化酵素(DNMT)結合的分子。(2) 分析鑑定LMP1 表現的細胞中，受到DNA 甲基化影響而改變表現量之蛋白分子。(3) 分析鑑定LMP1 表現的細胞中，調節DNA 甲基化作用或受到DNA 甲基化影響之蛋白激脢訊息傳遞途徑。(4) 整體分析LMP1 表現的細胞及臨床鼻咽癌檢體中，DNA 甲基化及之蛋白激脢訊息傳遞途徑情況。上述研究工作完成後，我們預期可以得到下列成果：(1)建立鼻咽癌細胞及表現LMP1之鼻咽癌細胞的蛋白質表現圖譜；(2)鑑定出受到LMP1 影響而改變表現量之蛋白分子；(3)找出受到LMP1 影響而形成的DNA 轉譯抑制作用複合結構(transcriptionalrepressioncomplex)中的分子；(4)發現更多受到LMP1 影響而被甲基化之基因；(5)瞭解蛋白激脢訊息傳遞途徑如何參與LMP1 調節DNA 甲基化的作用，或受到LMP1 調節DNA 甲基化作用的影響。此一計畫的完成將可找出與細胞轉型及轉移有重要關聯性之蛋白分子，同時提供重要證據來說明LMP1 如何促使腫瘤細胞產生後天性的變化---這是前人未曾研究過的一個重要課題。

系統編號:PC9308-2402
原計畫編號:NSC93-2745-B182-004-URD