以動物微型正子攝影模式研究Phosphoglycerate Kinase-1合成蛋白對胰臟惡性腫瘤的影響

胰臟惡性腫瘤在診斷治療上的困難，從過去至今一直是臨床醫師及病人的夢魘。它居國內惡性腫瘤發生率第十~十一位，病人的五年存活率平均僅有5~10%。病人即使僥倖能接受開刀切除後，其術後五年存活率也僅有約15~20%。對於胰臟惡性腫瘤的分子生物學研究過去一直僅限於DNA 或mRNA 的層次，這也只能對突變基因的蛋白質產物得到部份了解，臨床上的應用有限。為了更深入瞭解胰臟惡性腫瘤病患體內相關基因表現改變，以及這些基因造成的蛋白質變化，以蛋白質體分析對腫瘤細胞不同表現的研究，是十分可行及先進的方法。我們在過去五年來，利用基因體技術的研究已發現GAPDH (Glyceraldehyde-3-phosphateDehydrogenase)、GDNF、PSA、TFIIH、PGER、Grancalin、HMG、以及PGK-1(Phosphoglyceratekinase-1 )等基因會在胰臟癌組織中呈現較強的表現反應。我們同時進一歩以蛋白質體分析蛋白質點表現的差異，發現PGK-1 基因所表現的蛋白質phosphoglycerate kinase-1 一直在2D膠質電泳片上呈現異常的顯現點。為進一步確定此蛋白質的表現，我們以雷射捕捉微分析儀將胰臟腫瘤細胞作精細收集後，以西方墨點分析可以證明PGK-1 在腫瘤細胞呈現較明顯的反應。另外以免疫化學染色方法也可有意義的在腫瘤細胞呈現PGK-1 抗體的表現染色。此外由腫瘤銀行所收集的三十三位胰臟惡性腫瘤病患的血清，以Elisa 方法測定顯現其平均血清值也較非腫瘤病患的血清值有意義的較高。PGK-1 在惡性胰臟腫瘤的表現意義由上述研究可得明証，本研究醫學文獻目前尚無類似的發表，論文於去年在「Proteomics」雜誌刊登。此外過去兩年，我們繼續利用核心蛋白質體研究室的設備，分析有關胰臟癌細胞的PGK-1 蛋白質表現意義，及腫瘤銀行儲存的胰臟癌和其他惡性腺性腫瘤病人之相關生物資訊分析比較；另外再以SiRNA 來抑制或注射此蛋白質的表現，顯示其對胰臟惡性腫瘤有促進生長之影響。未來三年的延續計劃，第一年我們將以SiRNA 來抑制或注射此蛋白質的表現後長出的胰臟癌細胞分析其血管密度及內涵PGK-1 蛋白質的表現；第二年我們將將分析有關以小動物微正子攝影模式研究比較抑制胰臟癌細胞的PGK-1 蛋白質表現後，在裸鼠活體內的分布表現；第三年將以合成的PGK-1 蛋白質注射入裸鼠，再以小動物微正子攝影模式研究比較比較腫瘤長出的大小，並作免疫組織染色及蛋白質體分析，用2D 膠質電泳及MALDI-TOF 質譜儀分析兩組細胞之蛋白質表現差異。我們希望這些研究完成後，早日進入新藥的開發試驗，期能對胰臟惡性腫瘤病患提供更新的診斷及治療新希望。

系統編號:PC9709-0943
原計畫編號:NSC97-2314-B182-007-MY3