探討細本葡萄調節人類血小板及嗜中性白血球交互作用---天然物調控嗜中性白血球活性，進而抑制活化的血小板刺激嗜中性細胞外陷阱捕捉之研究

研究細本葡萄成份 (VTs：VT-1,VT-6) 調控人類嗜中性白血球與血小板交互作用機轉、探討血小板刺激嗜中性白血球細胞外陷阱捕捉 (neutrophil extracellular traps; NET) 的機轉與藥物效果。VTs 在全血系統抑制 fMLP 引起的嗜中性白血球與血小板吸付，抑制 LPS、thrombin 活化的血小板刺激嗜中性白血球NET 的產生。VTs 輕微影響血小板功能，因此研究VTs 對嗜中性白血球的抑制機轉是否和VTs 在全血、血小板活化嗜中性白血球 NET 有關。分述如下：VT-1 以濃度正相關且專一性抑制 fMLP 所引起的白血球活化功能 [抑制自由基 (ROS) 釋放，IC50 為21.88±2.59 μM] 與訊息傳遞 (ERK、AKT 磷酸化)，但VT-1 不影響 PKC 的細胞內訊息。經流式細胞儀分析VT-1 抑制 fMLP 和受體結合 (FPR：N-formyl peptide receptor 或 FPRL1：N-formyl peptide receptor-like 1)。當 VT-1 合併 FPRL1 抑制劑 (WRW4) 加成性抑制fMLP 受體結合及ROS 生成，推測 VT-1 可能拮抗 FPR。VT-6 不競爭fMLP 受體結合，VT-6 抑制 fMLP 刺激的ROS、細胞移動及Src 酪氨酸激酶磷酸化，但VT-6 不影響Src 酵素本身活性，當VT-6 合併Src 抑制劑 (PP2) 加成性抑制 fMLP 刺激嗜中性白血球活化。β-arrestin 為 Src 上游活化因子，推測 VT-6 影響β-arrestin 從細胞內移動到細胞膜上，連帶抑制fMLP 刺激Src 磷酸化及引起的白血球活化 。接續研究 VTs 對血小板及白血球各別作用機轉進而抑制兩者交互作用，探討 VTs 對血小板刺激白血球NET 分子機轉，並以動物血栓及肝臟再灌流模式，評估細木葡萄成份的應用。

系統編號:PC10507-1233
原計畫編號:MOST105-2320-B182-004-MY3