黃酮類藥物在人類氣管細胞上對Cytokines誘導發炎蛋白表現的藥理作用

在過敏性氣喘病患的支氣管肺泡沖洗液中，可發現一些發炎前驅物質如腫瘤壞死因子(TNF-)及介白素(IL-1)等細胞激素有濃度增高的現象。細胞激素藉由調控許多種如細胞激素、化學趨向物、蛋白分解酶、受體蛋白、環氧化酶及黏著分子等的基因表現強烈刺激發炎反應的進行。細胞激素刺激一些標的蛋白的表現可能牽涉經由重回呼吸道上的活化性白血球而使呼吸道發炎反應加劇以及呼吸道重塑的訊號傳遞的網路中。我們之前的研究報告指出在氣管平滑肌細胞及肺泡上皮細胞(A549)中，TNF-及IL-1會活化如p42/p44 MAPK、p38 MAPK 及JNK 等所有的MAPKs，另外也會活化PI3K-/AKT、轉活化生長因子的受體和NF-B。活化這些訊號傳遞路徑會引發一些發炎性蛋白如黏著分子、COX-2、cPLA2 及金屬蛋白酶(MMP-9)等的表現。這些因子皆與呼吸道發炎反應有密切的關係。雖然發炎的病理機轉已被廣泛的研究，但在臨床上並未找到有效的治療方式。因此本研究主要集中焦點在發展和評估中草藥對人類呼吸道上皮細胞及氣管平滑肌細胞抑制如黏著分子、COX-2、cPLA2、MMP-9 等發炎性蛋白表現的效力。植物性黃酮具有抗氧化及抗發炎功能而被認為是對人體健康有益的食品。在許多種細胞中植物性黃酮能抑制包括PI3K/Akt、AMP-activated kinase、protein kinase C、epidermal growth factor receptor tyrosine kinase及IκB kinase 等多種tyrosine 與serine/threonine 蛋白質激酶的活性。這些蛋白質激酶都會參與包括細胞激素等發炎性蛋白的表現。植物黃酮化合物強力抑制上述一些酵素的效果顯示其在抗發炎的治療策略上具有很大的潛力。在本研究計畫中，我們將探討在人類呼吸道上皮細胞及氣管平滑肌細胞中，植物黃酮是否可以及經由何種的作用機轉來抑制COX-2、cPLA2、ICAM-1、VCAM-1 與MMP-9 等與呼吸道發炎反應相關因子的表現。本計劃的長期目標是設定在研究，植物黃酮是否可以及經由何種的作用機轉來抑制COX-2、cPLA2、ICAM-1、VCMA-1 與MMP-9 等與呼吸道發炎反應相關因子的表現。目前的研究將進行測定黃酮化合物對TNF-作用在人類氣管平滑肌細胞及A549 細胞，活化MAPKs, PI3K/Akt、轉活化EGFR 及PDGFR、以及NF-B 轉移作用的抑制能力。另外也要深究此類的化合物如何影響TNF-調控細胞內包括c-fos、c-jun、AP-1、NF-κB、histone acetylation and deacetylation 和p300 等轉錄因子的表現。因此，在整個研究過程中我們將追尋與闡明黃酮類的化合物在人類氣管平滑肌細胞及呼吸道上皮細胞中，以何種的作用機轉來降低TNF-透過活化p42/p44 MAPK、p38 MAPK 及JNK、PI3K-/AKT，轉活化生長因子的受體和NF-κB等訊號傳遞路徑引發發炎性蛋白的表現。因此我們將研究的重點歸納在以下的項目：1. 測定不同的黃酮類化合物對TNF-誘發COX-2、cPLA2、ICAM-1、VCMA-1 與MMP-9 表現的抑制效果。2. 測定不同的黃酮類化合物抑制TNF-刺激MAPKs 磷酸化的效應。3. 測定不同的黃酮類化合物抑制TNF-轉活化生長因子的受體的效應。4. 評估不同的黃酮類化合物降低TNF-引發PI3K/Akt 磷酸化的效力。5. 探討不同的黃酮類化合物如何影響TNF-活化NF-κB。6. 探討不同的黃酮類化合物藉由何種的分子作用機轉來干擾MAPKs、PI3K-/AKT 及轉活化生長因子受體、NF-κB等訊號傳遞上下游路徑來達到抗發炎反應的結果。偵測不同的黃酮類化合物對TNF-調控轉錄因子表現的影響力。

系統編號:PC9709-0199
原計畫編號:NSC97-2320-B182-008