建立以miR101為基準之基因互動網路以發展肝癌之動物模式及尋找可能之肝癌治療葯物

肝癌是台灣男性的第一號殺手，它是肝細胞經歷一系列基因變異而產生。因此要瞭解肝癌發生的分子機制與尋求有效之治療策略，必先找出發生變異的關鍵調控基因或基因互動網路。過去基因表現的分析偏重在mRNA 層次，但最近發現miRNA 也同時參與了基因表現的調控，miRNA不僅可以影響mRNA 還會透過抑制translation 而調控蛋白質的量。過去對miRNA 本身如何被調控？而miRNA 又如何與受影響的mRNA 及蛋白質形成調控網路影響癌細胞的研究不多。最近我們實驗室發現活化PKC 會使肝癌細胞生長停止，同時誘發許多miRNA 的增加。我們發現這些增加的miRNA 中有7 個miRNA(101, 125b,29c, 139-5p, 195, 150 和497)在人類肝癌組織中明顯下降，因此這一組可被PKC 同時調控的miRNA 很可能協同一致透過對相關mRNA 及蛋白質的調控形成一組抑癌網路，而此一網路的運作在肝癌中可能失常或瓦解。若能回復肝癌細胞中此一網路的運作，當可抑制肝癌的成長而成為有效治療肝癌之方法。因此本計劃擬結合TPA 對肝癌細胞HepG2 的mRNA、miRNA 及蛋白質調控的資訊，與肝癌組織中對應的資訊共同建構出一個完整的「miRNA主控基因的抑癌網路」。再利用小分子葯物調控mRNA 資料庫比對，找出會影響「miRNA 主控基因的抑癌網路」中核心基因變化的葯物。然後測試這些葯物能否透過對核心基因的調控而使「miRNA 主控基因的抑癌網路」在肝癌細胞中恢復正常運作，而抑制肝癌的成長，成為治療肝癌葯物的先導葯物。在本計劃中我們試圖回答以下三個問題：1、 7 個miRNA 如何被TPA 協同一致地調控？而這個調控為何在肝癌細胞中失常？2、發展生物資訊的工具，建構「miRNA 主控基因的抑癌網路」。3、 miR101 及其他miRNA 上昇時所引起基因調控網路的變化是否可以由小分子葯物所模擬，恢復抑癌網路的功能而作為肝癌治療之先導葯物。4、建立miR101 剔除老鼠之肝癌動物模式，來檢驗基因調控網路之正確性及探討肝癌治療葯物之可行性。同時探討miR101 與mi122 以及Pten 的刪除是否會共同合作引發肝癌的發生。

系統編號:PA9907-3102
原計畫編號:NSC99-2311-B182-004-MY3